产品货号：
KD0382
中文名称：
NM4-64神经元荧光探针
英文名称：
NM4-64神经元荧光探针
产品规格：
1mg
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1～3天
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产品简介：
神经末梢探针是一系列阳离子型苯乙烯基荧光染料，用于跟踪神经肌肉连接或突触的突触活动。这类染料通常具有亲脂性尾部(两个碳链)和带阳离子的高亲水性头部。神经末梢染料被命名为NerveRed或NerveGreen后接一个碳数，表示亲脂性尾巴的长度。NM染料具有相似的结构，此外，它们在带正电的头部具有醛固定胺。
阳离子苯乙烯基染料是通过活性依赖性染色突触小泡来发挥功能。染料与细胞或组织共孵育时，染料的水相部分没有荧光，而染料的亲脂性尾部插入细胞膜并呈现强荧光。神经刺激后，在进行胞吞作用时，染料被包裹在囊泡内，因此，洗去细胞表面附着的染料后，荧光信号强弱表示新形成的囊泡的数量的多少。反之，在胞吐作用时，染料与神经递质一起从囊泡释放，导致荧光信号减少。因此，荧光强度的变化反映了胞吞/胞吐或突触活动的情况。内吞过程中荧光增加的速率——“结合速率”和胞吐过程中荧光减少的速率——“解离速率”因染料种类而异。通常，具有较长亲脂性尾部和更多双键的染料对膜具有较高的亲和力，因此具有较高的结合速率和较低的解离速率。
本产品等同于AM4-64，NM4-64染料能用于固定细胞染色。
操作说明(仅供参考)
以下是在盖玻片上对培养的神经元细胞的神经末梢染色，然后进行固定和免疫染色的方案。
神经末梢染料也可用于标记非神经元细胞类型的内吞囊泡。染色可以在4℃进行以选择性标记质膜;在室温或37℃下，染料的内吞通常在10min内发生。可以使用台氏液液或其它缓冲液，可选择性添加钠离子通道阻断剂河豚毒素(TTX)，其目的是阻断动作电位并防止染色后的突触囊泡释放。用于特定实验的最佳方案需要由实验者摸索。
1.在50mM台氏液中稀释神经末梢染料至最终浓度为4μM。在室温下将含有细胞的盖玻片置于该溶液中1min，使细胞完全浸没。
2.将盖玻片转移至台氏液+ 0.5μM河豚毒素(TTX)溶液中，室温下孵育1min。
3.室温下，用台氏液+ 0.5μM TTX溶液反复多次洗涤盖玻片。
4.固定。将盖玻片用4%多聚甲醛，室温固定20min。
5.将盖玻片直接转移至预冷的含0.01%Triton X-100的PBS中，4℃放置10min。
6.预冷的PBS洗三次，每次1min。
7.在含有一抗的10%的血清/PBS中，4℃染色3h。抗体浓度应该为常规免疫荧光染色的两倍。
8.预冷的PBS洗三次，每次1min。
9.在含有二抗的2%的血清/PBS中，4℃染色40min。抗体浓度与常规免疫荧光染色的相同即可。
10.预冷的PBS洗三次，每次1min。
11.荧光显微镜下拍照观察。
图.NM4-64在脂质体中的吸收和发射光谱
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